石蜡包埋步骤
1.组织取材2毫米厚度,固定于福尔马林数小时后再换以新鲜福尔马林固定数小时。
在实际操作中,各级酒精脱水的时间可以因组织的大小,多少而减少或延长,如要在酒精中过夜最好是在低浓度酒精中浸泡,透明过程一定适当掌握,不要时间过长。更换脱水酒精,如从节约的角度考虑,可将各级酒精逐级下降使用,如无水酒精可降为95%酒精在继续使用。应考虑到组织在酒精中脱水过程里,除去组织中的水分混入酒精,使其浓度降低外,组织中的一些可溶物质,如脂类也可被酒精溶解,酒精中含有一定这样的物质时,将会降低脱水功效,因此,最好是更换酒精。
组织脱水,透明彻底后,浸蜡过程在必要时候可以延长,例如,在石蜡中过夜,但温箱一定要恒温,以免组织块受高温影响,造成组织过度硬化。
快速石蜡包埋法
快速切片诊断是在数十分中或半小时左右制成切片并作出诊断的一种手段,主要用于手术中决定手术的切除范围和手术方式。快速切片的方法包括冰冻切片和快速石蜡切片。
制作快速石蜡切片时,切取组织应该薄小,从固定、脱水到浸蜡的全过程都要加温,一般是先将各种试剂在超声波快速石蜡脱水仪中预热,恒温下操作,整个过程大约在10-15分钟即可完成。
操作过程:
(1)先取病变组织于AAF中固定3-5分钟。
(2)95%酒精1分钟。
(3)无水酒精1分钟
(4)正丁醇1/3丙酮2/3混合液1分钟
(5)二甲苯1分钟
(6)浸蜡1-2分钟
(7)包埋,将组织置于预先备置的蜡块中(固体石蜡包埋法);预备一硬蜡块,用热镊子于蜡块中间熔蜡一小部分,在以热镊子从蜡杯内取出已与石蜡饱和之组织块投入融蜡中,冷固后,立即进行石蜡切片。石蜡切片附贴后,在火上稍加烘烤使组织切片上石蜡全部熔化,水分也被烘干,然后投入二甲苯,100%酒精,95%酒精各30秒脱蜡,入水冲洗,常规苏木素,伊红染色。
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